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埃澤思細胞凍存液如何使用,有哪些注意事項

發布時間: 2021-11-19  點擊次數: 333次
  埃澤思細胞凍存液是細胞保存的主要方法之一,利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。
  
  細胞冷凍的原理在于盡可能降低細胞內的晶體形成,減少細胞內水凝固所形成的高濃度溶質對細胞造成的低溫損傷,從提高細胞復蘇時的存活率。
  
  細胞凍存的數量應保證復蘇時低溫保護劑獲稀釋,稀釋后的細胞濃度扔高于正常傳代的細胞濃度為宜,這是因為當低溫保護劑稀釋以后,該濃度一般不會對細胞造成毒性損傷。
  
  細胞凍存液主要由FBS、DMSO等組成,是非常經典的一種無菌凍存液。用于各種哺乳動物原代細胞、傳代細胞系、雜交瘤細胞等的凍存。
  
  埃澤思細胞凍存液操作步驟:
  
  1、培養細胞至對數生長晚起,顯微鏡觀察其外觀、形態、有無污染等,取狀態良好的細胞進行凍存操作。如為貼壁生長細胞,用胰蛋白酶消化并用完全培養基終止消化,進行細胞計數;如為懸浮生長細胞,進行細胞計數。
  
  2、加入適量的通用細胞凍存液,重懸細胞,使細胞濃度達到ml,置于凍存管中,密封,不要擰的太緊,避免彎曲變形。
  
  3、一般進行凍存。亦可采用-20℃30min,-70℃過夜,后置于液氮罐中長期存儲。
  
  埃澤思細胞凍存液注意事項:
  
  1、注意在超凈工作臺內無菌操作,盡量避免污染。
  
  2、初次使用融化后可在4℃保存1個月,單應減少反復凍融的次數,以免失效。
  
  3、雜交瘤細胞凍存時應定期復蘇,檢查細胞的活性和分泌抗體的穩定性。
  
  4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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