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使用BEX電轉儀,這些知識點你得知道!

發布時間: 2021-12-03  點擊次數: 520次
  在生物醫學和生物技術研究領域里,研究者經常需要把DNA、RNA、siRNA、多肽、蛋白質、抗體、藥物以及其他物質導入細胞里,用于研究它們的生物功能。BEX電轉儀可高效地將核酸導入所有測試過的哺乳動物細胞類型中,包括難轉染的細胞、原代細胞和干細胞等,具有相當出色的轉染效率和極低的死亡率。
  
  電轉染過程中,細胞懸浮在可以保護細胞的緩沖液中,需要被導入細胞的物質被混合在緩沖液中,然后細胞樣品加入電擊管。將電擊管插入適配器的孔中,關上翻蓋將電擊管接入電路。接著在屏幕上的控制界面完成參數設置,隨后開始電轉,電脈沖將流過細胞樣品。完成電轉后,屏幕上會出現一個波形圖,此時電轉已經完成,可以將電擊管取出。
  
  對于大多數細胞,電轉時細胞密度需要至少10M/ml,推薦細胞密度在20M‐50M/ml。細胞密度越高可以增加細胞間電流輔助,從而增加細胞的有效電轉面積。
  
  需要特別注意的地方:一個樣品加進電擊管后,不要等候,馬上進行電轉,完成后再處理下一個樣品,不要把一批樣品全部加樣完成后再一起電轉。
  
  等候時間過長,細胞沉降也會導致電擊管內上下細胞密度不均勻而降低電轉效率。電轉完成后細胞可以馬上取出培養,也可以等全部樣品處理完畢再取出培養。
  
  當細胞聚團時,其中只有一側細胞可以被電轉,中間和另一側細胞不能被電轉,降低BEX電轉儀的效率。所以消化細胞過程中注意細胞不要成團。
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